作者domoto01 (Chia)
看板Chemistry
標題[實驗] HPLC圖譜基線飄移
時間Fri Jul 15 12:03:46 2011
想請問版上做過HPLC的各位先進們
你們有過打HPLC圖譜的基線不穩定的情形發生嗎?
我本來以為是guard column打太多支sample,髒掉了
前天換了新的quard column之後
打水和標準品的基線還是彎彎曲曲的
沒有成一水平線
老師的意思是很擔心會不會是機器壞掉
修理費用很貴= =
我有在考慮要不要洗column?.......
我等一下會打電話問問廠商這種情形
是人為問題因素大還是機器問題
但也想了解一下大家的經驗
我是個初學者。才打過5~6次而已
之前教我的學長他也沒有想到這基線不穩定是發生什麼問題
另外我有看到有人推薦可以看HPLC的書籍
不知有沒有推薦的書名呢?還是不錯的PAPER?
真的謝謝各位得分享和回答了~
--
※ 發信站: 批踢踢實業坊(ptt.cc)
◆ From: 219.85.28.117
推 jkking:偵測器是哪一種? UV MS? 07/15 12:54
→ jkking:管柱壓力線正常嗎? 07/15 12:55
→ sisay:有degas嘛? 平衡時間夠久嘛? 07/15 13:34
→ sisay:Practical.HPLC.Method.Development 07/15 13:39
→ sisay:Introduction to Modern Liquid Chromatography 07/15 13:39
→ sisay:另外detector是UV還是..? 07/15 13:41
→ sisay:guard column只會讓壓力上升 我覺得不影響基線 07/15 13:42
推 iori23041114:條件相關的資訊提供的有點少。 07/15 14:20
→ domoto01:不好意思。我補充一下情況。偵測器是UV。有degas。平衡時 07/15 22:46
→ domoto01:間為一個小時。有關壓力的部分,是有比之前打的狀況高。 07/15 22:46
→ domoto01:我記錄的壓力為一開始清洗管線的壓力,之前大約是1520psi 07/15 22:52
→ domoto01:左右,基線飄移那次壓力為1580psi。另外平衡壓力也有記錄 07/15 22:53
→ domoto01:之前大約是1610psi左右,後來增加到1670psi。 07/15 22:54
→ domoto01:打一次樣品的壓力記錄曲線,看起來也有回到一開始的壓力 07/15 23:00
推 jkking:UV的基線跟梯度也有關係,可能是管路髒了或是移動相的問題? 07/15 23:23
推 HPLC:波長是? 07/15 23:50
→ domoto01:我今天有在思考該不會就是buffer沒配好這個基本問題... 07/16 00:44
→ domoto01:希望不要是偵測器壞了。波長是254nm。 07/16 00:46
推 Corsairs:看一下lamp的使用總時數,說不定是壽命到了,換個lamp就好 07/17 14:59
→ domoto01:謝謝大家熱心的回答。那兩本書學校剛好有我會借來看。 07/18 00:14