[爆卦]Primer 濃度換算是什麼?優點缺點精華區懶人包

為什麼這篇Primer 濃度換算鄉民發文收入到精華區:因為在Primer 濃度換算這個討論話題中,有許多相關的文章在討論,這篇最有參考價值!作者Ianthegood (雜碎。)看板Biotech標題Re: [求救] primer單位換算時間...


※ 引述《jernie (jernie)》之銘言:
: ※ 引述《jernie (jernie)》之銘言:
: : 不好意思! 問個蠢問題
: : 如果買來的primer用245ul ddH20 溶解 Final stock 是100mM
: : 若用165ul ddH20 溶解 Final stock 是165ug/ul
: : Primer 的mw 6490
: : 但是最近要做site-directed mutagenesis, protocol上的primer是1.25 μl (125 ng)
: : of oligonucleotide control prime , 請問要怎麼計算?
: : (以上數據是假設的,因為primer還沒來)
: Primer 100mM要如何换算成125ng
: (1.25ng/ul)


照你給的條件

我給兩個算法


算法一 高中化學法

100mM = 0.1 M = 0.1 mol/L = (6490 * 0.1) g/L

125 nG = 1.25 * 10^-7 g = V * 649 g/L

V = [(1.25 * 10^-7) / 649] L = (1.25*10^-1)/649 / uL

= 0.000192 uL


算法二 目標濃度換算(ref. Stratagene quikchange manual p.6)

X (pmole) = 125/6490 * 1000 = 19.3 pmole

V * 100mM = 19.3 pmole

V = (19.3/100) pmole/mM = 0.000193 uL





不過一般我們primer stock都是回溶成100uM

不知道你為什麼會訂到這麼大量 是一般人的1000倍




下面開放戰ip

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biingru: 小魯我以前就是用上面兩種硬算的 讚 08/25 10:31
chaunen: 我用final 0.2uM 可以mutant成功 08/27 13:42

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