[爆卦]次世代定序比較是什麼?優點缺點精華區懶人包

為什麼這篇次世代定序比較鄉民發文收入到精華區:因為在次世代定序比較這個討論話題中,有許多相關的文章在討論,這篇最有參考價值!作者snark (影燕)看板ckbc標題Re: [閒聊] 關於次世代定序(NGS)時間Tue Oct...

次世代定序比較 在 老師說我PE要加強 Instagram 的最佳貼文

2021-07-11 08:51:42

生化是個距離我有點遠的科目,它其實相當有趣! 大部分的人應該都覺得生物化學的生物成分比較高,化學是他的遠親 我自己是把生化分成兩個主題 分子生物 Molecular Biology 其實他的名字有點讓人誤導(就跟轉譯醫學一樣哈哈哈),分子生物主要在討論DNA複製、轉錄、轉譯、基因表現與調控,...


※ 引述《aaeaiaoaua (蒲公英)》之銘言:
: 最近我專題討論在寫關於次世代定序(Next Generation Sequencing, NGS) 的介紹,
: 這是一類大約在2006年開始普及化的定序技術,目前大家都認為應該是革命性的影響
: ,對於生物研究大部分領域都帶來新的思維。
: 目前主流的技術平台是 Roche 454 和 illumina solexa 兩種系統,常被比較的還有
: 快被淘汰的 ABI SOLiD 平台。另外,「第三代定序」的幾個平台也上市了,例如
: Helicos、Pacific Biosciences等幾家。
: 這些都可以當關鍵字去搜尋(例如去youtube搜尋)。
: 不過我記得高中的時候很多社員(包括我)對於傳統的Sanger定序都還不熟 (記得我參
: 加暑訓的時候跑堂有教過,但聽不太懂 ),所以應該不大有辦法討論什麼次世代定序。
: 聽說現在社團課時間都有安排活動,分生組如果有興趣的話,可以來開個「定序」或
: 「DNA 複製」之類的專門課程,藉機認識一下這門新技術,相信對於各個組都會很有
: 幫助的。
: 話說社展也可以考慮這個題目喲!
: ------------------------
: 這篇非常詳細,大推:
: http://www.labmed.org.tw/UpFiles/Issues/201076111035.pdf
: 這個網誌也有很多篇介紹:
: http://ppt.cc/Xc6V
: 如果想要了解次世代定序,我覺得youtube是個不錯的工具,很多超炫的動畫呈現得
: 非常精緻。
這裡來談一些 文章中比較少講到 比較進階的閱讀


到底定序可以做甚麼?

1.Genetic Analyses常常利用基因突變研究基因的功能
但是篩選出有興趣的性狀之後 要找到哪個地方有突變就有很多工作做了
 例如在酵母菌中 complementation, meiotic analysis and molecular cloning
 是常用的三種方法 
 但是到底突變珠的基因中有幾個突變? 
 能complementation 仍不一定是同一個基因
 
 目前可以定序之後找出 突變的位置 
 在比較實驗的結果可以更快地找出造成性狀的突變

2.ChIP-seq
利用Chromatin immunoprecipitation (ChIP)
純化出與某蛋白結合的DNA片段之後
 可以用 next generation sequencing

3.結合 next generation sequencing and a metagenomic approach
 已經加速病毒的發現


目前定序的問題?

目前的方法常常都是用訂出 短序列之後再 連接
The fragments are assembled into contigs.
這樣的資料處理往往使用 dynamic programming
所以會遇到一些問題

例如:
a.基因體中有高度重複序列 而且 沒有近似物種被並定序過可以當參考時

b.heterozygous 怎麼處理 或定義

c.virus 在宿主體內繁殖 基本上是 quasispecies 這樣要如何定序
  不僅有Global haplotype assembly
  實際開發程式發現 組合過多 連資料貯存都有困難

e. 許多新的方法正在突破短序列的限制 這樣可以解決以上很多的問題

相關文獻

1.Ultra-deep sequencing for the analysis of viral populations


2. Error correction of next-generation sequencing data
  and reliable estimation of HIV quasispecies
Nucleic Acids Research, Volume 38, Number 21, 21 November 2010
, pp. 7400-7409(10)



Nature Reviews Genetics 13, 36-46 (January 2012) | doi:10.1038/nrg3117
Repetitive DNA and next-generation sequencing:
computational challenges and solutions

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※ 發信站: 批踢踢實業坊(ptt.cc)
◆ From: 156.111.131.212
aochiu1992:推! 10/30 11:59
aaeaiaoaua:推!總算拋磚引玉了! 10/30 15:51
starjimmy:另外可以講的是exome sequencing 是一種比較窮人版 11/01 11:21
starjimmy:的high throughput sequencing 不過data會比較有直接 11/01 11:21
starjimmy:解讀的好處 (becuase they are coding sequence) 11/01 11:22
aaeaiaoaua:樓上超久不見了!!! 11/01 13:55
aaeaiaoaua:我最近就是想做transcriptome的NGS 11/01 13:56
aaeaiaoaua:不過不知道學長說的是不是這個意思 11/01 13:58

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