為什麼這篇勝任細胞製備cacl2鄉民發文收入到精華區：因為在勝任細胞製備cacl2這個討論話題中，有許多相關的文章在討論，這篇最有參考價值！作者otota (武家傳奏)看板Biotech標題[求救] 有關於非E.Coli系統的compete...
在下目前要進行E.Coli以外的菌種的competent cell的製備
目前要做的菌種有Bacillus sp., Pantoea sp.,以及Sphingomonas sp.
以便接下來進行transformation的步驟(heat shock的)
雖然已經嘗試使用一般E.Coli的勝任細胞製作法(CaCl2的方式)
並且以抗生素Amp進行篩選
但感覺transformation之後效率不高，或者是之後的plasmid DNA萃取上沒有目標物
著實困擾
於是想請問一下版上的大大們
對於E.Coli以外的菌種Competent Cell 製備是否有其他的方式可以進行
以及是否有其他要注意的地方或細節
--
※ 發信站: 批踢踢實業坊(ptt.cc)
◆ From: 140.130.9.8
→ chl20020933:不會查paper? 12/09 14:53
→ otota:paper有查過了，但他那邊是用電穿孔，而不是heat shock 12/09 15:44
推 milkpa:就是因為不好送才不用化學法...... 12/09 15:52
→ otota:嗯...目前是有操作過轉型前跟轉型後的塗盤(with Amp)，轉型 12/09 15:58
→ otota:前沒有colony出現，而轉型後的有出現，這樣算是成功嗎?還是 12/09 15:59
→ otota:這種為Psudo的情況？ 12/09 15:59
→ chl20020933:g+細菌用化學法要先處理成protoplast不會比較好用 12/09 16:19
→ chl20020933:而且不是所有細菌都可以處理成有competence能力 12/09 16:21