為什麼這篇勝任細胞製備鄉民發文收入到精華區：因為在勝任細胞製備這個討論話題中，有許多相關的文章在討論，這篇最有參考價值！作者otota (武家傳奏)看板Biotech標題[求救] 有關於非E.Coli系統的compete...
勝任細胞製備 在 古典好好聽 Instagram 的最佳貼文
2020-05-24 18:59:58
「歌者的智慧」筆記 在「符立中筆記」音樂評論的書中，偶讀到一段資深聲樂家金慶雲老師的話，深有同感「在一切的藝術中，音樂最是短命。而在沒有留聲機的時代裡，任何用語言或文字對音樂的描述，都像是水中撈月，而在一切的音樂詮釋中，演唱家的生命更是短促，隨著身體的衰老與死亡，死去的不只是一個演唱者，連同他的樂...
在下目前要進行E.Coli以外的菌種的competent cell的製備
目前要做的菌種有Bacillus sp., Pantoea sp.,以及Sphingomonas sp.
以便接下來進行transformation的步驟(heat shock的)
雖然已經嘗試使用一般E.Coli的勝任細胞製作法(CaCl2的方式)
並且以抗生素Amp進行篩選
但感覺transformation之後效率不高，或者是之後的plasmid DNA萃取上沒有目標物
著實困擾
於是想請問一下版上的大大們
對於E.Coli以外的菌種Competent Cell 製備是否有其他的方式可以進行
以及是否有其他要注意的地方或細節
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◆ From: 140.130.9.8
→ chl20020933:不會查paper? 12/09 14:53
→ otota:paper有查過了，但他那邊是用電穿孔，而不是heat shock 12/09 15:44
推 milkpa:就是因為不好送才不用化學法...... 12/09 15:52
→ otota:嗯...目前是有操作過轉型前跟轉型後的塗盤(with Amp)，轉型 12/09 15:58
→ otota:前沒有colony出現，而轉型後的有出現，這樣算是成功嗎?還是 12/09 15:59
→ otota:這種為Psudo的情況？ 12/09 15:59
→ chl20020933:g+細菌用化學法要先處理成protoplast不會比較好用 12/09 16:19
→ chl20020933:而且不是所有細菌都可以處理成有competence能力 12/09 16:21