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如何令PCR 引物設計事半功倍效果？ - 每日頭條

PCR 反應的特異性很大程度上依賴於引物的解鏈溫度（Tm 值）。 ... 對於由20 個或更少個鹼基組成的短序列，可用Wallace 原理計算其第一位近似值。

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