[爆卦]qpcr ct值範圍是什麼?優點缺點精華區懶人包

為什麼這篇qpcr ct值範圍鄉民發文收入到精華區:因為在qpcr ct值範圍這個討論話題中,有許多相關的文章在討論,這篇最有參考價值!作者guest999 (I'm guest)看板Biotech標題[求救] qPCR的CT值...


我是real time PCR新手

想來請教大家下面幾個data處理和判讀問題

計算方式是用相對定量

internal control是用 Gapdh

遇到的問題是:

1. 實驗結果的CT值好像都會有浮動現象,

一般來說,怎樣的數據結果是可用的,是否有criteria可以參照?

internal control的變異性必須在怎樣的固定範圍內,其數據的RQ值才可信賴

例如 Gapdh CT值需落於20-30之間,甚至於23-27標準

2. real time PCR這種實驗,怎樣的數據才算是一個牢靠性夠的結果?

除了3重複可使實驗現象的有再現性,還有什麼需要注意的地方?

比方做western blot 大家都希望internal control 的band是較一致的,

這樣大家才願意去相信他的實驗結果




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liuse: 三重複後算t-test 結果有星星就放paper了阿 02/11 02:39
Ianthegood: 三個well沒有差太多就好 這種東西你敢放我就敢信 02/11 09:09
chaunen: http://0rz.tw/hAAHI 02/11 21:39
Ezc: CT值受細胞數量影響很大,應該不會有固定範圍 02/26 02:46
Ezc: 有些實驗室則會把total RNA量稀釋到極相近再測 02/26 02:48
Ezc: 還有同樓上說的,qPCR算是大家還滿相信的了 02/26 02:49

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