作者knowledge265 (lonelyvenice)
看板Biotech
標題[求救] compound分裝後失效了
時間Wed Dec 21 12:21:57 2016
發問時請注意,若是要問實驗相關的問題,請將實驗的步驟、所用的條件大致列出
以方便板友幫您追蹤問題
若是求救事項涉及實驗室智慧財產(例如細胞細菌植株、質體載體等)之分讓,
請務必註明貴實驗室願意設立 正式合作或 簽署材料分讓協議(MTA),否則版工將逕行刪除
----請將上列注意事項以 ctrl + k 刪除後開始編輯文章---- 小弟我目前是在做加藥實驗,以compound treatment後觀察細胞凋亡
目前手上有2隻compound都是溶於DMSO中,2隻compound是完全不同萃取物的
配置成10mM的stock後保存
一開始用MTT篩的時候IC50很確定大概在0.5uM,由於考量到多次解凍問題,於是將stock
分成數小管分裝好,但是在我分裝完後再進行MTT後發現0.5uM完全沒效,compound存在
-20度冷凍且有避光,不知道有沒有人有辦法解決這種問題
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推 openlee: 卡 12/21 12:24
推 cellpharmacy: 有多的powder重新配製嗎? 12/21 15:35
→ cellpharmacy: 說不定藥本身溶於DMSO是不穩定的 12/21 15:37
→ knowledge265: 沒有多的Powder喔 但是根據以前的文獻都是用DMSO 12/21 16:13
→ vetvet: 由棕色玻璃瓶換到1.5ml塑膠tube? 12/21 18:29
推 lunarblue: 基本上溶液態的試樣可能因為小尺度的aggregation或是與 12/21 19:31
→ lunarblue: 溶劑作用而使其有效濃度降低,特別的是DMSO也具有一定 12/21 19:32
→ lunarblue: 化學活性,因此即使分管保存,仍會有壞掉的可能。此外 12/21 19:33
→ lunarblue: 溶劑中所含有的氧氣亦有可能造成氧化性的化學轉換 12/21 19:33
→ lunarblue: 當然這種現象不是一定會發生,畢竟DMSO的確是個很好使 12/21 19:34
→ lunarblue: 用的溶劑。解決方法其一為上面推文所述,重新以powder 12/21 19:35
→ lunarblue: 配置stock soln,其二為若化合物珍貴不易取得,則可建 12/21 19:35
→ lunarblue: 議就現有溶液中重新純化取得純化合物。 12/21 19:36
→ lunarblue: 若發現此現象,爾後的實驗規劃需注意調整實驗日程,儘 12/21 19:38
→ lunarblue: 量新鮮配置試樣 12/21 19:38
→ lunarblue: 東西不是冰起來就不會壞的~ 12/21 19:38