為什麼這篇雙硫鍵鄉民發文收入到精華區:因為在雙硫鍵這個討論話題中,有許多相關的文章在討論,這篇最有參考價值!作者duck00192 (鴨子)看板Biotech標題[求救] 打斷protein 雙硫鍵的方法時間...
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2021-05-16 07:45:18
. #喜歡吃麵的站出來~ 你喜歡吃軟麵還是QQ麵呢? 本人一定要吃有彈性的那種,整個口感才對啊!🤤 不過麵條這麼Q是加了不少添加物嗎?🧐 📍黃麵與白麵的差異 白麵➪➪➪ 麵粉➕鹽(促進雙硫鍵形成) 黃麵➪➪➪ 麵粉➕鹼液(增加麵筋彈性) 📍Q彈來源的來源是麵筋 #麵筋 是麵粉...
我所研究的protein總共有四對雙硫鍵
已知它和某種cell line有很強的interaction
用點突變和cell ELISA的方法找出的結合位的區域大多與帶正電或疏水性amino acid 有關
目前推測他的三級結構會形成一個groove而與細胞上的ligand結合
因此我想設計實驗把這個三級的結構打亂看是否會影響其與細胞的結合力
但若把整個蛋白用urea 或者 GuHCl整個denature怕之後protein會沉澱
所以想用比較溫和的方式加入還原劑打斷雙硫鍵就好
但又要考慮這個還原劑是否對細胞會有毒性
目前考慮的是先在蛋白中加入reduced glutathione然後再把buffer置換掉
再來做MTT看是否對cell有毒性 之後再做cell ELISA
目前想到能做的大概就是這樣 但總覺得不夠完善
想請各位前輩指點一下 是否還有其他的方法
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