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《國際期刊Antiviral Research 2020/04/03：FDA 核准藥物伊維菌素 (Ivermectin) 可抑制新型冠狀病毒複製》摘要翻譯

< 亮點 >
1. 伊維菌素在體外(in vitro) 可抑制新型冠症病毒（SARS-CoV-2）。
2. 單一處理能夠在細胞培養皿中48小時內將病毒減少約5000倍。
3.伊維菌素已獲得FDA批准用於寄生蟲感染，因此具有老藥新用的潛力。
4.世界衛生組織將伊維菌素因列入基本藥物標準清單中而被世界各國廣泛使用。


< 摘要 >
FDA批准的的抗寄生蟲藥物 Ivermectin 以前被證明具有體外廣效的抗病毒活性，我們的實驗證明的伊維菌素僅添加Vero-hSLAM可抑制新型冠狀病毒，細胞感染新冠肺炎病毒2小時後，能夠在48小時內將病毒RNA減少約5000倍。 因此，伊維菌素有必要進一步研究其對人類的潛在益處。


伊維菌素是經FDA批准的廣效抗寄生蟲藥，近年來，我們與其他研究小組一起證明對體外多種病毒具有抗病毒活性。 伊維菌素最初被確定為人類免疫缺陷病毒1（HIV-1）整合酶（IN）與importin（IMP）α/β1異二聚體之間相互作用的抑製劑，而伊維菌素已被證實可抑制IMP、和HIV-1複製。 伊維菌素的其他作用已有報導，但伊維菌素已顯示抑制宿主和病毒蛋白（包括猿猴病毒SV40大腫瘤抗原（T-ag）和登革熱病毒（DENV））的IMP的 結構蛋白55。重要的是，已證明它可以限制RNA病毒的感染，例如DENV 1-44，West Nile Virus10，委內瑞拉馬腦炎病毒（VEEV）和流行性感冒，這種廣效活性被認為是由於感染期間許多不同RNA病毒對IMPα/β1的依賴性。


伊維菌素已被證明在體外和體內均能有效對抗DNA病毒假狂犬病病毒（PRV），並且伊維菌素治療可提高被PRV感染的小鼠的存活率。 在小鼠中未觀察到伊維菌素抗Zika病毒（ZIKV）的功效，但作者承認研究限制證明重新評估伊維菌素的抗ZIKV活性是正確的。 最後，伊維菌素是2014-2017年泰國針對DENV感染的一項III期臨床試驗的重點，在該試驗中，觀察到每日口服一次劑量是安全的，並導致血清NS1蛋白水平明顯降低，但是 沒有觀察到病毒血症或臨床獲益的變化(見下文)。


當前新冠肺炎流行的病原體新型冠狀病毒SARS-CoV-2是一種單鏈陽性RNA病毒，與SARS-CoV密切相關。 對SARS-CoV蛋白的研究表明，在感染期間SARS-CoV Nucleocapsid蛋白的信號依賴性核質關閉中，IMPα/β1可能具有潛在作用，這可能會影響宿主細胞分裂。 此外，SARS-CoV輔助蛋白ORF6已顯示是通過在粗糙的ER /高爾基膜上隔離IMPα/β1來拮抗STAT1轉錄因子的抗病毒活性。 綜上所述，這些報告表明伊維菌素的核轉運抑制活性可能對SARS-CoV-2有效。


為了測試伊維菌素對SARS-CoV-2的抗病毒活性，我們用SARS-CoV-2分離株Australia / VIC01 / 2020以0.1的MOI感染Vero / hSLAM細胞2小時，然後加入5μM伊維菌素。 在第0-3天收到上清液和細胞沉澱，並通過RT-PCR分析SARS-CoV-2 RNA的複制（圖1A / B）。 與媒介物DMSO相比，在24小時後，用伊維菌素處理的樣品的上清液（指釋放的病毒體）中存在的病毒RNA減少了93％。 同樣，用伊維菌素處理後，觀察到細胞相關病毒RNA減少了99.8％（指未釋放和未包裝的病毒體）。


到48小時，與對照樣品相比，這種作用增加了伊維菌素處理後，減少病毒RNA約5000倍，顯示伊維菌素處理48小時內基本上所有病毒物質有效減損。 與這個想法一致，在72小時沒有觀察到病毒RNA的進一步減少。 正如我們先前觀察到的3、4、5所示，在樣品孔中或在平行測試的單獨藥物樣品中，在任何測試的時間點均未觀察到伊維菌素的毒性。


為了進一步確定伊維菌素的有效性，在感染後兩小時使用伊維菌素系列稀釋液處理感染SARS-CoV-2的細胞，並在48小時收集上清液和細胞沉澱用於實時RT-PCR（圖1C / D）。 如上文所述，在48 小時的時候，用5μM伊維菌素處理的樣品的上清液和細胞沉澱均觀察到病毒RNA減少> 5000，等於這些樣品中病毒RNA減少了99.98％。 同樣，在任何測試濃度下，依維菌素均未觀察到毒性。


在這些條件下，伊維菌素治療的IC50被確定為〜2μM。 該方法確實檢測到SARS-CoV-2病毒，使用針對病毒RdRpp基因（圖1E / F）而非E基因（上圖）的特異性引物重複了RT-PCR實驗，觀察到的結果幾乎相同 ，適用於已釋放的（上清液）和細胞相關病毒。


這些結果加在一起顯示，伊維菌素在體外對SARS-CoV-2臨床分離株具有抗病毒作用，單劑量能夠在我們的系統中24-48小時內控制病毒複製。 我們假設這可能是通過抑制IMPα/β1介導的病毒蛋白的核輸入（圖1G），如其他RNA病毒所示。 在SARS-CoV-2的情況下確認這種機制，以及確定受影響的特定SARS-CoV-2和/或宿主成分是該實驗室未來工作的重點。 歸根結底，如果能在感染初期給患者使用有效的SARS-CoV-2抗病毒藥物，就可以限制病毒載量，防止惡化為重症並限制人與人之間的傳播。


因此，在可行的情況下，進一步測試伊維菌素針對SARS-CoV-2的其他潛在抗病毒藥物的替代作用以及其他作用機制的基準將是重要的。 該簡要報告提出了伊維菌素可能是一種有效的抗病毒藥物，可以抑制SARS-CoV-2，與已經報導的22、23、24、25、26類似。 所有這些都應盡快進行，直到其中之一被證明在臨床上是有益的。


伊維菌素具有已建立的供人類使用的安全性，並且已獲得FDA批准用於多種寄生蟲感染。 重要的是，最近的綜述和分析顯示，高劑量的伊維菌素具有與標準低劑量治療相當的安全性，儘管沒有足夠的證據得出關於懷孕婦女妊娠安全性的結論。 進一步評估新冠肺炎患者的可能獲益的關鍵下一步，將是檢查可模仿目前批准的伊維菌素在人體中使用的多次加藥方案。 如前所述，伊維菌素是泰國登革熱患者最近的一項III期臨床試驗的重點，在該試驗中，發現單日劑量是安全的，但沒有產生任何臨床益處。


然而，研究人員指出，基於藥代動力學數據，可能會開發出改進的給藥方案。 儘管DENV顯然與SARS-CoV-2有很大不同，但該試驗設計應為將來的工作提供參考。 總而言之，本報告結合已知的安全性概況表明，伊維菌素作為可能的SARS-CoV-2抗病毒藥物值得進一步考慮。


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【原文】
標題：The FDA-approved Drug Ivermectin inhibits the replication of SARS-CoV-2 in vitro
作者：Leon Caly, Kylie M.Wagstaff
發表日期：April 3, 2020
國際期刊：Antiviral Research
https://www.sciencedirect.com/science/article/pii/S0166354220302011

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🌸食譜：
超級香的台式蔥花米麵包來囉！
吃過的人都難以想像這是用全白米製作的麵包，內部組織濕潤鬆軟的口感，真的讓人驚艷！
另外也很推薦製作薄脆的版本，把一半份量的麵糊倒入琺瑯烤盤當中，烤出來的成品非常像義式薄脆餅，讓人一口接著一口，完全聽不下來的美好滋味，強烈推薦一定要試做一次看看！
純白米製作麵包最大的優點就是沒有溢酸脹氣的問題，而且清爽低油，熱量較低，製作過程簡單，也不需揉麵、出薄膜，真的很推薦大家試試用白米做麵包。
💪成功幫大家試出用攪拌棒打米成漿的方法，有需要拍成影片的舉手🙋‍♂+1統計一下～

📌詳細文字食譜🔗
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📌影片小撇步
1.發至1.7-1.8倍大就要立即放入烤箱，否則容易過度發酵。
就算這時烤箱預熱溫度還沒到也要立刻送進烤箱來烘烤。
2. 如果米糊過稀表示米粒還沒完全徹底粉碎，一定要打到像稀釋的白膠一樣有些黏稠度。
強烈建議使用破壁機才能打的夠細緻，否則普通果汁機打得不夠細還有碎米粒的殘留，會沉澱在麵糊的底部，組織無法順利撐起發酵。
若用馬力較弱的果汁機可試試拉長攪打時間，停停打打，但要注意麵糊溫度不要超過攝氏43度。

｛米麵糊重點整理｝
👉只要打到無一點米粒殘留（細緻）、溫度不超過43度C基本上隨便你怎麼打。（石磨也可以）
我影片必須考量到所有人有可能遇到的狀況，所以會比較謹慎，有停機、刮杯等動作。
👉溫度只是為了加快酵母發酵、幫助發酵，酵母發酵喜歡接近人體的溫度。
如果沒有這樣的溫度就算在冰箱低溫冷藏發酵也可以，基本上就是想辦法讓米糊發酵至接近2倍（1.8、1.9倍）
👉米糊容易表面乾燥，所以任何靜置時，盡可能保濕、噴水霧。
👉基本上有點溫度都能感覺麵糊是活的在呼吸（仔細看），如果沒動靜，酵母應該死了。
我用即溶速發酵母，要換任何其他天然酵母皆可，但請重新換算用量，網路很多分享。

👩🏻‍🍳 食材 Recipes
《米麵包體》
生米340克（泡水後約450克）
奶油或液態油40克
楓糖漿或蜂蜜24克
鹽6克
即溶速發酵母6克
清水220克
《麵包香蒽餡》
青蔥50克
胡椒鹽0.5小匙
全蛋15克
豬油(或食用油)10克
✅喜歡蔥餡的可按比例加倍份量


☘️料理名稱＆做法不一定正統，食譜純粹以個人經驗改良分享 ，請多包涵指教。

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Q1：均適奶昔一定要晚餐吃嗎？
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A2：乳糖不耐症主要是因為身體缺乏消化分解乳糖的酵素─乳糖酶，因此當攝取含有乳糖的乳製品 後，消化不良進而導致腹痛、腹脹或腹瀉等腸胃不適症狀。如有乳糖不耐症，建議循序漸進、 少量稀釋等方式增加乳製品攝取量，腸胃道便會刺激乳糖酶的分泌，當乳糖酶的分泌量逐漸增 加，自然改善乳糖不耐狀況。適應過程建議可搭配益生菌產品，調節、舒緩可能產生的腸胃不 適狀況。

Q3：不敢喝均適奶昔怎麼辦？
A3：若因味道不敢喝奶昔，建議可用無糖茶或咖啡泡奶昔，或用半份或 1 份水果與 1 包奶昔打成果昔 後飲用。

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